2017年临床助理医师《生物化学》复习笔记：第三章酶_第5页

　　第五节 酶的制备和应用

　　一、酶的制备

　　酶可以从动物、植物、微生物等各种原料中提取或用微生物发酵法生产酶制剂。酶在生物体内与大量其他物质共同存在，含量很少，又是有催化活性蛋白质，除了采用分离纯化蛋白质的一般方法，如盐析、有机溶剂沉淀、吸附、凝胶过滤、超离心法外，还要注意防止强酸、强碱、高温和剧烈搅拌等，以避免酶活力的损失。

　　胞内酶和胞外酶的提取在处理方法上有所不同。胞内酶需要先用捣碎、砂磨、冻融、或自溶等方法将细胞破坏，然后再用适当的分离纯化技术提出。

　　酶的活力(activity)就是酶加快其所催化的化学反应速度的能力。一般用催化反应的起始速率(Vo)表示，Vo的单位是微摩尔/分，也可用国际单位(U)和“开特”(Kat)表示。1分钟内催化1微摩尔的作用物转变成产物的酶量为1U;1秒钟内催化1摩尔的作用物转变成产物的酶量为1Kat。1微摩尔/分=1U=16.67nKat(1Kat=6×107U)。

　　比较酶制剂的纯度可用比活力(specific activity)，即每毫克蛋白质中所含的U数。

　　二、酶的应用

　　早在19世纪末，就有酶制剂的商品生产，目前已有1千多种，在工业、农业、医药以及科学研究中日益发挥它的巨大作用。

　　例如淀粉酶用于纺织品的退浆，可节约大量的碱并提高棉布的质量。处理饲料以增加其营养价值。脂肪酶用于食品增香、羊毛洗涤。蛋白酶用于皮革业的脱毛、蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清、洗涤剂去污等。葡萄糖异构酶用来制造果糖浆，葡糖氧化酶用来除去罐头中残余的氧。

　　酶可作为试剂用于临床检验，如酶联免疫测定;作为药物用于临床治疗，如胃蛋白酶、胰蛋白酶助消化，链激酶、尿激酶治疗血栓的形成;基因工程中应用各种限制性核酸内切酶进行科研和生产。

　　酶的开发和利用是现代生物技术的重要内容。1971年命名了酶工程(enzyme engineering)，这是把酶学原理与化学工程技术及基因重组技术相结合而形成的新型应用技术。酶工程可分为化学酶工程和生物酶工程。前者指天然酶、化学修饰酶、固定化酶及人工模拟酶的研究和生产;后者指克隆酶、突变酶和合成新酶等内容的研究和应用。

　　例题：

　　1、酶的活性中心是指：(　D 　)

　　A.酶分子上含有必需基团的肽段 B.酶分子与底物结合的部位

　　C.酶分子与辅酶结合的部位 D.酶分子发挥催化作用的关键性结构区

　　E.酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域

　　2、酶催化作用对能量的影响在于：(　B 　)

　　A.增加产物能量水平 B.降低活化能 C.降低反应物能量水平

　　D.降低反应的自由能 E.增加活化能

　　3、竞争性抑制剂作用特点是：(　B 　)

　　A.与酶的底物竞争激活剂 B.与酶的底物竞争酶的活性中心

　　C. 与酶的底物竞争酶的辅基 D.与酶的底物竞争酶的必需基团;

　　E. 与酶的底物竞争酶的变构剂