2017年临床执业医师_医学微生物学章节笔记：第十六单元动物源性细菌_第2页

　　第二节 耶尔森菌属

　　耶尔森菌属(Yersinia)细菌属于肠杆菌科，是一类革兰阴性小杆菌。包括11个菌种，其中鼠疫耶氏菌、小肠结肠炎耶氏菌与假结核耶氏菌等三种肯定是人类致病菌。本属细菌通常先引起啮齿动物、家畜和鸟类等动物感染，人类通过接触动物、被节肢动物叮咬或食入污染食物等途径感染。

　　一 鼠疫耶 氏菌

　　鼠疫耶氏菌(Y.pestis)俗称鼠疫杆菌，是鼠疫的病原菌。鼠疫是一种自然疫源性的烈性传染病，历史上曾发生过三次世界性大流行。人类鼠疫是被疫鼠的鼠蚤叮咬而受染，1989~1998年世界各地报告鼠疫病例共5440余例，死亡681人，病死率11%。因此，鼠疫依然威胁着人类。

　　(一)生物学性状

　　形态与染色

　　为形两端浓染的卵圆短杆菌。大小为0.5~0.8 ×1~2mm。一般单个散在，偶尔成双或呈短链。有荚膜，无鞭毛，无芽胞。革兰染色阴性。从死于鼠疫的尸体或动物新鲜内脏制备的印片或涂片，形态典型，有时可见到吞噬细胞内外均有本菌。但在化脓或溃疡性病灶及腐败材料中可见菌体膨大成球形，且着色不佳。如在陈旧培养物或生长在含高盐(30g/L NaCl)的培养基上则呈多形态性，有球形、杆形、棒形和哑铃状等，亦可见到着色极浅的细菌轮廓，称菌影(ghost)。

　　培养特性

　　兼性厌氧，最适生长温度为27~30℃，最适pH为6.9~7.2。在普通培养基上能生长，但生长缓慢。在含血液或组织液的培养基上生长， 24~48h可形成柔软、粘稠的粗糙型菌落。在肉汤培养基中开始呈混浊，24h后表现为沉淀生长，48h后逐渐形成菌膜，稍加摇动菌膜呈“钟乳石”状下沉，此特征有一定鉴别意义。

　　抗原结构

　　鼠疫耶氏菌的抗原结构复杂，至少有18种抗原，重要的有F1、V-W、外膜蛋白和MT等四种抗原。

　　1.F1(fraction 1)抗原

　　是鼠疫耶氏菌的荚膜抗原，于37℃时产生，具有抗吞噬和活化补体的作用。F1的抗原性强，特异性高，其相应抗体具有免疫保护作用。但F1抗原是一种不耐热的糖蛋白，100℃15min即失去抗原性。

　　2.V和W抗原

　　系毒力质粒DNA编码。W抗原位于菌体表面，是一种脂蛋白;V抗原存在于细胞质中，为可溶性蛋白。两种抗原总是一起产生，与细菌毒力有关，使细菌具有形成肉芽肿损伤和在细胞内存活的能力，且有免疫抑制作用。

　　3.外膜蛋白(Yersinia outer membrane proteins,Yop)

　　其编码基因与V-W基因存在于同一质粒上，在37℃和含Ca2+条件下能产生数种外膜蛋白，这些蛋白能使细菌在突破宿主的防御机制，导致机体发病等方面具有重要作用。

　　4.鼠毒素(murine toxin,MT)

　　为可溶性蛋白，是一种外毒素，对鼠类有剧烈毒性，1mg即可使鼠致死，它可阻断动物b肾上腺能神经和引起心脏损害，但对人的损伤作用尚不清楚。MT具有良好的抗原性，用0.2%甲醛处理可使其脱毒制成类毒素，用于免疫动物制备抗毒素。

　　5.内毒素

　　其性质与肠道杆菌内毒素相似，可致机体发热，产生休克和DIC等。

　　抵抗力

　　对理化因素抵抗力较弱。湿热70~80℃10min或100℃1min死亡，5%来苏或5%石炭酸20min内可将痰液中病菌杀死，但在自然环境中的痰液中能存活36d，在蚤粪和土壤中能存活1年左右。

　　变异性

　　鼠疫耶氏菌通过自发或诱发性突变、转座子移位及基因转移等机制发生变异，其生化特性、毒力、耐药性和抗原构造等均可出现变异菌株。与多数肠道菌光滑(S)型菌落致病性强的特征不同，野生菌株的菌落呈粗糙(R)型。经人工传代培养后菌落逐渐变为S型，其毒力也随之减弱。

　　(二)致病性与免疫性

　　致病物质

　　鼠毒素主要对鼠类致病，具外毒素性质，但只有当细菌自溶裂解后才释放。鼠疫耶氏菌的毒力很强，少数几个细菌即可使人致病，其致病性主要与F1抗原、V-W抗原、外膜抗原及内毒素等相关。

　　所致疾病

　　鼠疫是自然疫源性传染病，一般先在鼠类间发病和流行，通过鼠蚤的叮咬而传染人类，尤其当大批病鼠死亡后，失去宿主的鼠蚤转向人群。人患鼠疫后，又可通过人蚤或呼吸道等途径在人群间流行。临床常见有腺型、肺型和败血症型鼠疫。

　　鼠疫耶氏菌侵入人体，被吞噬细胞吞噬后能在细胞内生长繁殖，并沿淋巴流到达局部淋巴结，引起严重的淋巴结炎。犯及的淋巴结多在腹股沟，一般为单侧，并引起肿胀、出血和坏死，称为腺鼠疫。如吸入染菌的尘埃则引起原发性肺鼠疫，也可由腺型或败血症型鼠疫蔓延而致继发性肺鼠疫。病人高热寒战，咳嗽、胸痛、喀血、呼吸困难，全身衰竭而出现严重中毒症状，多于2~4d内死亡。病人死亡后皮肤常呈黑紫色，故有“黑死病”之称。重症腺型或肺型鼠疫患者的病原菌可侵入血流，导致败血症型鼠疫，体温升高至39~40℃，发生休克和DIC，皮肤粘膜见出血点及淤斑，常并发支气管肺炎和脑膜炎等症状，多迅速恶化而死亡。

　　免疫性

　　鼠疫感染后能获得牢固免疫力，再次感染罕见。主要产生针对F1抗原、V-W抗原的抗体等，具有调理促吞噬、凝集细菌及杀菌等作用。另外，尚依赖于吞噬细胞吞杀细菌等细胞免疫的作用。

　　(三) 微生物学检查

　　标本

　　按不同病型采取淋巴结穿刺液、痰、血液等。人或动物尸体取肝、脾、肺、肿大淋巴结和心血等。陈旧尸体取骨髓。因鼠疫为法定甲类烈性传染病，其传染性极强，除标本采取时要严格无菌操作和控制外，标本必须送指定的具有严格防护措施的专门实验室，并按严格操作规程进行。

　　直接涂片镜检

　　检材直接涂片或印片，分别进行革兰染色和美蓝染色，镜检观察典型形态与染色性。免疫荧光试验用于快速诊断。

　　分离培养与鉴定

　　将检材接种于血琼脂平板或0.025%亚硫酸钠琼脂平板等，经24h孵育后形成针尖样小菌落，经48h后才形成1~1.5mm灰白色较粘稠的粗糙型菌落。在液体培养基中孵育48h可形成“钟乳石”现象。当分离出可疑菌落时，可作涂片镜检，噬菌体裂解试验，血清凝集试验等进一步鉴定。

　　(四) 防治原则

　　灭鼠灭蚤是切断鼠疫传播环节，消灭鼠疫源的根本措施。我国目前应用EV无毒株生产活菌疫苗，多用皮下、皮内接种或皮上划痕，免疫力可维持8~10个月。此外，应加强国境、海关检疫。

　　治疗必须早期足量用药，采用磺胺类、链霉素、氯霉素、氨基糖苷类抗生素等均有效。

　　二、 小肠结肠炎耶氏菌

　　小肠结肠炎耶氏菌(Y.enterocolitica)是引起人类严重的小肠结肠炎的病原菌。本菌天然集居在多种动物体内，如鼠、兔、猪等，通过污染食物(牛奶、肉类等)和水，经粪口途径感染或因接触染疫动物而感染。近年来本菌中某些血清型引起的肠道感染正逐渐上升。

　　(一) 生物学性状

　　形态与染色

　　革兰阴性球杆菌，偶见两端浓染。无芽胞、无荚膜，25℃培养时有周身鞭毛，但37℃培养时则很少或无鞭毛。

　　培养特性

　　兼性厌氧。耐低温，在4℃能生长，但最适温度为20~

　　28℃，最适pH7.6。在普通琼脂培养基上生长良好。某些菌株在血琼脂平板上可出现溶血环，在肠道菌选择培养基上形成不发酵乳糖的无色半透明、扁平的小菌落。

　　血清型

　　根据菌体O抗原可分为50多种血清型，但仅几种血清型与致病有关，且致病型别各地区也不同。我国主要为O:9、O:8、O:5和O:3等。此外有毒力菌株大都具有V和W抗原、外毒素蛋白等。

　　(二) 致病性

　　致病物质

　　本菌为一种肠道致病菌，具有侵袭性及产毒素性。V-W抗原具有抗吞噬作用。O:3、O:8、O:9等菌株产生耐热性肠毒素，与大肠埃希菌肠毒素ST相似。另外，某些菌株的O抗原与人体组织有共同抗原，可刺激机体产生自身抗体，引起自身免疫性疾病。

　　所致疾病

　　本菌为人畜共患病原菌。人类通过食用污染的食物和水而受染，潜伏期3~7d，临床表现以小肠、结肠炎为多见，也见有败血症者。临床上可出现发热，腹泻为粘液或水样便，易与志贺菌痢混淆。根据病变位置与发病机制不同，可将小肠结肠炎分为四型：①胃肠炎(或小肠结肠炎)型;②回肠末端炎、阑尾炎和肠系膜淋巴结炎型;③结节性红斑与关节炎型(自身免疫病);④败血症型。

　　(三) 微生物学检查

　　标本取粪便、血液和剩余食物等，根据该菌嗜冷特性，将标本置pH 7.4~7.8的磷酸盐缓冲盐水中,于4℃增菌2～3w;再用耶氏菌专用选择培养基置25℃培养24~48h，挑取可疑菌落进行鉴定。主要鉴定依据为25℃培养时动力阳性，嗜冷性、脲酶阳性、H2S阳性及血清学鉴定等。

　　三 、 假结核耶氏菌

　　假结核耶氏菌(Y.pseudotuberculosis)存在于多种动物的肠道中,人类感染较少，主要通过食用患病动物污染的食物而感染。由于该菌在动物感染的脏器中形成粟粒状结核结节，在人的感染部位形成结核样肉芽肿，故称假结核耶氏菌。

　　本菌具多形态性，呈球状或短杆状。革兰阴性。无荚膜、无芽胞，在病变组织中菌体两端浓染。需氧或兼性厌氧，最适生长温度为25℃，且出现动力，37℃培养动力消失。本菌的生化反应与鼠疫耶氏菌相似，引起的疾病与小肠结肠炎耶氏菌相似。根据耐热的菌体O抗原将细菌分为6个血清型，引起人类感染的主要是O1血清型。毒力菌株大部分具有V和W抗原。

　　假结核耶氏菌对豚鼠、家兔、鼠类等有很强的致病性，患病动物的肝、脾、肺和淋巴结等可形成多发性粟粒状结核结节。人类感染多为胃肠炎，肠系膜淋巴结肉芽肿，回肠末端炎等，后者的症状与阑尾炎相似，多发生于5~15岁的学龄儿童，并易发展为败血症。少数表现为高热、紫癜，并伴有肝、脾肿大，类似肠伤寒的症状。并有呈结节性红斑等自身免疫病症的。

　　临床取粪便、血液等标本进行微生物学检查。多采用肠道选择性鉴别培养基进行分离培养，25℃培养48h，根据生化反应及动力等，作出初步判断，最后用血清学试验进行鉴定。

　　本菌感染应用广谱抗生素进行治疗。