答案部分
一、A1
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 重组DNA的连接包括下述内容,其中不包括C。外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。粘端连接、平端DNA连接、质粒载体中的快速克隆都是重组DNA的连接方式。
2、
【正确答案】 B
【答案解析】 基因重组只包括:接合、转化、转导或转座。而基因转换特指减数分裂过程中两条染色体非同源DNA片段的转移,不属于基因重组。
3、
【正确答案】 E
【答案解析】 限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和II酶。相当一部分酶(如EcoRI、BamHI、Hind等)的切口,作用点有180°旋转对称性,因而可形成粘性末端,但也有一些II类酶如BsuRI、BalI、HalIII、HPaI、SmaI等切割DNA分子并不产生粘性末端,而只形成平整末端。
4、
【正确答案】 B
【答案解析】 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。已发现有质粒的细菌有几百种,已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状DNA分子(简称cccDNA)。
5、
【正确答案】 B
【答案解析】 外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口,当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化,这两种酶就是大肠杆菌DNA连接酶和T4噬菌体DNA连接酶。实际上在有克隆用途中,T4噬菌体DNA连接酶都是首选的用酶。这是因为在下述反应条件下,它就能有效地将平端DNA片段连接起来。
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